नेत्र रोगों में बैक्टीरियोलॉजिकल अनुसंधान का उपयोग करने की संभावनाएं पैथोलॉजिकल फोकस की पहुंच की सीमा तक सीमित हैं। जब यह आंख के पीछे के हिस्से में स्थित होता है, तो अक्सर शोध के लिए सामग्री प्राप्त करना बहुत मुश्किल होता है, और ऐसे मामलों में बैक्टीरियोलॉजिकल निदान की संभावना को बाहर रखा जाता है। नेत्र अभ्यास में बैक्टीरियोलॉजिकल डायग्नोस्टिक्स के आवेदन का मुख्य क्षेत्र बाहरी आंख के रोग, साथ ही मर्मज्ञ घाव हैं, जिसमें अनुसंधान के लिए सामग्री प्राप्त की जा सकती है शल्य चिकित्साघाव या एक विदेशी शरीर को हटाते समय। सामान्य तौर पर, यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि सर्जिकल हस्तक्षेपबैक्टीरियोलॉजिकल सामग्री प्राप्त करने की संभावनाओं की सीमा में काफी विस्तार हो रहा है।

अनुसंधान के लिए सामग्री प्राप्त करना

कंजंक्टिवल सैक से सामग्री प्राप्त करने के लिए, एक प्लैटिनम लूप का उपयोग किया जाता है (यदि यह उपलब्ध नहीं है, तो आप इलेक्ट्रिक स्टोव सर्पिल धागे, या किसी अन्य उपकरण (ग्लास रॉड, स्पैटुला, आदि) से बने लूप का उपयोग कर सकते हैं, जो पूर्व- अल्कोहल बर्नर की लौ में कैल्सीनेशन द्वारा निष्फल। निचली पलक को खींचकर, एक ठंडा लूप के साथ, कंजंक्टिवल डिस्चार्ज की एक गांठ को निचले फोर्निक्स की गहराई से पकड़ लिया जाता है। लूप को त्वचा और किनारों को छूने से बचना आवश्यक है पलकों की, ताकि विदेशी माइक्रोफ्लोरा को सामग्री में न लाया जाए। उपचार शुरू होने से पहले और सुबह में, जब निर्वहन अधिक प्रचुर मात्रा में हो, सामग्री लेने की सलाह दी जाती है। जब बलगम और मवाद की अनुपस्थिति में (उदाहरण के लिए) , सर्जरी से पहले एक स्वस्थ कंजाक्तिवा की जांच करते समय), आपको लैक्रिमल तरल पदार्थ का उपयोग करना चाहिए या संयोजी म्यान की सतह को थोड़ा खुरचना चाहिए (लिंडनर के अनुसार)। लेकिन ऐसे मामलों में एलिनिग विधि लागू करना बेहतर है: बाँझ शारीरिक खारा की एक बूंद दें पाश्चर पिपेट से कंजंक्टिवल थैली में घोल या शोरबा और कुछ सेकंड के बाद इस बूंद को चूसें।

समान हेतु सामान्य नियमसामग्री को लैक्रिमल थैली से प्राप्त किया जाता है, इसकी सामग्री को निचोड़कर, और पलक के किनारे से अल्सरेटिव ब्लेफेराइटिस के साथ, पहले अल्सर से क्रस्ट को हटा दिया जाता है।

कॉर्निया से सामग्री लेते समय विशेष रूप से रेंगने वाले कॉर्नियल अल्सर की उपस्थिति में बहुत सावधानी बरतने की आवश्यकता होती है। लूप (या अन्य कुंद यंत्र) को अल्सर की सतह पर तिरछा निर्देशित किया जाना चाहिए और इसके प्रगतिशील किनारे से सामग्री लेनी चाहिए। इसके लिए एनेस्थीसिया (1% डाइकेन की 3 बूँदें) और नेत्रगोलक के निर्धारण की आवश्यकता होती है।

आंख के मर्मज्ञ घावों के साथ अनुसंधान के लिए एक सामग्री के रूप में, आप घाव के निर्वहन (यदि कोई हो) का उपयोग कर सकते हैं, इसे लूप या धुंध झाड़ू के साथ कैप्चर कर सकते हैं, पूर्वकाल कक्ष के पंचर या निकाले जा सकते हैं विदेशी शरीर, जिसे 1-2 मिलीलीटर खारा के साथ एक बाँझ टेस्ट ट्यूब में रखा जाता है। ट्यूबों को हिलाने के बाद, शोध के लिए समाधान का उपयोग किया जाता है।

पूर्वकाल कक्ष से, अनुसंधान के लिए सामग्री पैरासेन्टेसिस के दौरान या पंचर द्वारा एक काटने के उपकरण से प्राप्त की जा सकती है। कॉर्निया को एनेस्थेटाइज़ करने के बाद (1% डाइकेन घोल की 3 बूँदें) और लिंबस पर नेत्रगोलक को तिरछे फिक्स करने के बाद, एक सिरिंज सुई इंजेक्ट की जाती है, पूर्वकाल कक्ष में डाली जाती है (सावधान रहें कि परितारिका और लेंस कैप्सूल को घायल न करें!) और 0.3 मिली। पूर्वकाल कक्ष की सामग्री महाप्राणित होती है।

एंडोफथालमिटिस के साथ, कांच के शरीर से सामग्री प्राप्त करने की आवश्यकता हो सकती है। नेत्रगोलक का पंचर एनेस्थीसिया के बाद किया जाता है (कंजक्टिवा के तहत नोवोकेन के 2% घोल का 1 मिली) एक तेज और चौड़ी पर्याप्त लुमेन सुई के साथ, भूमध्य रेखा के करीब इंजेक्ट किया जाता है। एस्पिरेटेड 0.3-0.5 मिली इंट्राओकुलर सामग्री।

परिणामी सामग्री को सूक्ष्म जीव की पहचान करने और उसके प्रकार (सूक्ष्मजीव निदान) को निर्धारित करने के लिए अध्ययन के अधीन किया जाता है। सामग्री का अध्ययन किया जा सकता है:

1. एक कांच की स्लाइड पर (बैक्टीरियोस्कोपिक विधि);
2. फसलों में (वास्तविक बैक्टीरियोलॉजिकल विधि);
3. एक पशु प्रयोग (जैविक विधि) में।

बैक्टीरियोस्कोपिक विधि

किसी भी नेत्र अस्पताल में एक साधारण के साथ इस्तेमाल किया जा सकता है प्रयोगशाला के उपकरणऔर कुछ अभिकर्मक।

इसके लिए आपके पास निम्नलिखित होना चाहिए:

1. धातु पाश;
2. साफ कांच की स्लाइड (एक साफ गिलास पर, पानी की एक बूंद फैलती है, और गोलाकार आकार नहीं लेती है);
3. कांच की स्लाइड (कांच की छड़ या मोटे तांबे के तार) के लिए स्टैंड के साथ एक ट्रे;
4. आसुत जल;
5. शराब;
6. चिमटी;
7. फिल्टर पेपर;
8. लुगोल का घोल (आयोडीन 1 ग्राम, पोटेशियम आयोडाइड 2 ग्राम, आसुत जल 300 मिली);
9. पेंट समाधान (अधिमानतः रबर के डिब्बे के साथ पिपेट के साथ बंद बोतलों में)।

सफाई के लिए, नए गिलास को 1% सोडा घोल (राख का उपयोग किया जा सकता है) में उबाला जाता है, और फिर पानी, कमजोर हाइड्रोक्लोरिक एसिड और फिर से पानी से धोया जाता है। उपयोग में आने वाले चश्मे को 1-2 घंटे के लिए सल्फ्यूरिक एसिड में रखा जाता है, जिसके बाद उन्हें सोडा के घोल में उबाला जाता है, पानी से धोया जाता है और 96 ° शराब में डुबोया जाता है। ग्लासों को या तो अल्कोहल में रखा जाता है, या अल्कोहल को पोंछने के बाद, ग्राउंड स्टॉपर्स के साथ जार में सुखाया जाता है।

सबसे अधिक इस्तेमाल किए जाने वाले पेंट हैं: सिलिया कार्बोलिक फुकसिन (मूल फुकसिन 1 ग्राम, क्रिस्टलीय कार्बोलिक एसिड 5 ग्राम, अल्कोहल 96 ° 10 मिली, ग्लिसरीन - कुछ बूंदें, आसुत जल 100 मिली)। रंग भरने के लिए, त्सिल्या मैजेंटा को आमतौर पर आसुत जल (पतला, या पानी मैजेंटा) के साथ 10 बार पतला किया जाता है। मेथिलीन नीला (मिथाइलीन नीला 10 ग्राम, शराब 96 ° 100 मिली)। इससे क्षारीय नीला लेफ़लर तैयार किया जाता है (नीला 30 मिली का अल्कोहल घोल, 1% पोटेशियम या सोडियम क्षार 1 मिली, आसुत जल 100 मिली)। कार्बोलिक जेंटियन वायलेट (उसी तरह से तैयार किया जाता है जैसे त्सिल्या कार्बोलिक फुकसिन)।

सूक्ष्मजीवों का या तो जीवित रूप में अध्ययन किया जाता है ("कुचल" और "फांसी" बूंदों की विधि), या मारे गए (रंगीन तैयारी में)। एक सजीव अध्ययन से मुख्य रूप से रोगाणुओं की सक्रिय रूप से गति करने की क्षमता का पता चलता है, जबकि सना हुआ तैयारी उनके आकारिकी का अच्छी तरह से अध्ययन करना संभव बनाती है।

साधारण रंगाई विधियाँ हैं, जब एक पेंट का आमतौर पर उपयोग किया जाता है, और जटिल धुंधला विधियाँ, जो माइक्रोबियल सेल की भौतिक रासायनिक संरचना की कुछ विशेषताओं को प्रकट करती हैं और इसलिए विभेदक नैदानिक ​​​​मूल्य हैं।

दागदार तैयारी तैयार करने की तकनीक इस प्रकार है। सामग्री को एक साफ कांच की स्लाइड पर लगाया जाता है और समान रूप से एक सर्कल या अंडाकार के रूप में सतह पर वितरित किया जाता है। स्मीयर काफी पतला होना चाहिए। गाढ़े मवाद की उपस्थिति में पहले आसुत जल की एक बूंद कांच की स्लाइड पर लगाना चाहिए और इस बूंद में सामग्री को हिलाना चाहिए। स्मीयर को हवा में सुखाया जाता है। सूखी तैयारी के साथ गिलास को अंगूठे और तर्जनी के साथ किनारों से ऊपर की ओर एक स्ट्रोक के साथ लिया जाता है और इसे अल्कोहल बर्नर की लौ से तीन बार (इसके प्रकाश और अंधेरे भागों की सीमा पर) पास करके तय किया जाता है। पर्याप्त फिक्सेशन के साथ, उंगलियों में हल्की जलन महसूस होती है। फिक्स्ड स्मीयर दागदार है। कई तैयारियां तैयार की जाती हैं, कम से कम दो, जिनमें से एक को साधारण तरीके से दाग दिया जाता है (लेफ़लर का मेथिलीन नीला, पतला ज़िहल फुकसिन), दूसरा - ग्राम विधि के अनुसार।

लेफ़लर धुंधला:

1. फिल्टर पेपर का एक टुकड़ा स्मीयर पर रखा जाता है और लेफ़लर के नीले रंग का घोल 3-5 मिनट के लिए डाला जाता है;
2. दवा को आसुत जल से धोया जाता है और सुखाया जाता है।

ग्राम स्टेन:

1. फिल्टर पेपर का एक टुकड़ा स्मीयर पर रखा जाता है, जिस पर 1-2 मिनट के लिए जेंटियन वायलेट का घोल डाला जाता है;
2. पेंट सूखा जाता है, कागज हटा दिया जाता है और पानी से धोए बिना, 1 मिनट के लिए तैयारी में लुगोल समाधान डाला जाता है; जबकि धब्बा काला हो जाता है;
3. लुगोल के घोल को निकाल दिया जाता है और स्मीयर को अल्कोहल के साथ फीका कर दिया जाता है (अधिमानतः दवा को एक गिलास शराब में डुबो कर जब तक कि बैंगनी धाराएं बहना बंद न हो जाएं);
4. पानी से अच्छी तरह धोया;
5. 1-2 मिनट के लिए पतला फुकसिन के साथ एक धब्बा डालें;
6. पेंट को हटा दें, दवा को पानी से धोकर सुखा लें।

सिनेव द्वारा संशोधित एक सुविधाजनक ग्राम विधि, जिसने जेंटियन वायलेट के घोल में भिगोकर पहले से तैयार फिल्टर पेपर के टुकड़ों का उपयोग करने का सुझाव दिया। पानी की 2-3 बूंदों को पहले स्मीयर पर लगाया जाता है और फिर कागज के इन टुकड़ों को रखा जाता है। फिर ऊपर बताए अनुसार आगे बढ़ें।

स्मीयरों की माइक्रोस्कोपी एक विसर्जन लेंस के साथ की जाती है। जब लोफ्लर के अनुसार दाग दिया जाता है, तो सभी रोगाणु नीले रंग के होते हैं; जब ग्राम के अनुसार दाग हो - या तो नीला-बैंगनी (ग्राम-पॉजिटिव रोगाणुओं) या लाल (ग्राम-नकारात्मक रोगाणुओं)।

बाहरी आंख के रोगों में शामिल रोगाणुओं की सीमित संख्या और उनकी विशिष्ट रूपात्मक विशेषताएं अक्सर केवल बैक्टीरियोस्कोपिक परीक्षा की मदद से एक सही सूक्ष्मजीवविज्ञानी निदान करना संभव बनाती हैं।

बैक्टीरियोलॉजिकल विधि

उन मामलों में आवश्यक हो जाता है जहां स्मीयर में अध्ययन सूक्ष्म जीव के प्रकार को स्थापित करने के लिए अपर्याप्त है या जीवाणुरोधी दवाओं के लिए पृथक रोगज़नक़ की संवेदनशीलता को निर्धारित करने की आवश्यकता है।

सूक्ष्म जीव विज्ञान पर विशेष नियमावली के लिए बैक्टीरियोलॉजिकल विधि के साथ एक विस्तृत परिचित का जिक्र करते हुए, हम यहां केवल इस पद्धति के सिद्धांतों पर ध्यान केंद्रित करते हैं। काम का पहला चरण कुछ प्रकार के रोगाणुओं के अलगाव के लिए कम हो जाता है, अर्थात शुद्ध संस्कृतियों को प्राप्त करने के लिए। ऐसा करने के लिए, वे बुवाई के दौरान सामग्री के यांत्रिक पृथक्करण और मीडिया के उपयोग का सहारा लेते हैं जो कथित रोगजनकों (वैकल्पिक मीडिया) के विकास के लिए सबसे उपयुक्त हैं। माध्यम पर उगाई जाने वाली अलग-अलग कॉलोनियों को फिर से उगाने से, एक शुद्ध संस्कृति प्राप्त होती है, जिसे एक माइक्रोस्कोप के तहत जांचा जाता है (स्मीयर तैयार किए जाते हैं) और रोगज़नक़ के जैव रासायनिक गुणों का अध्ययन करने के लिए विभेदक निदान मीडिया पर उपसंस्कृत किया जाता है।

खेती की परिस्थितियों में आंखों के लिए रोगजनक अधिकांश रोगाणुओं की उच्च मांगों ने उनके अलगाव के लिए देशी प्रोटीन युक्त वैकल्पिक मीडिया के अधिमान्य उपयोग को जन्म दिया। ये हैं, उदाहरण के लिए, एल्स्चनिग का माध्यम (एक भाग हॉर्स सीरम या एसिटिक द्रव और दो भाग शोरबा), क्लॉटेड लोफ्लर सीरम (तीन भाग मट्ठा और एक भाग शोरबा 1% पेप्टोन, 0.5% NaCl और 1% अंगूर चीनी के साथ), रक्त अगर लेवेंथल (अगर और 5-10% डिफाइब्रिनेटेड रक्त)।

एंटीबायोटिक दवाओं के प्रति रोगाणुओं की संवेदनशीलता को निर्धारित करने के संबंध में, ऐसा करने का सबसे सरल तरीका व्यावसायिक रूप से निर्मित फिल्टर पेपर डिस्क का उपयोग करना है जो एंटीबायोटिक समाधानों में भिगोया जाता है और एक वैक्यूम में सूख जाता है। शोध के लिए सामग्री (मवाद, पंचर, निकाले गए विदेशी शरीर) को खारा (1.5-2 मिली) के साथ एक बाँझ ट्यूब में रखा जाता है। मिलाने के बाद, तरल पेट्री डिश में डाला जाता है, अधिमानतः दो - एक चीनी के साथ, दूसरा रक्त अगर के साथ - और समान रूप से मिलाते हुए माध्यम की सतह पर वितरित किया जाता है। फिर विभिन्न एंटीबायोटिक दवाओं के साथ डिस्क को एक दूसरे से और कप के किनारे से 2 सेमी की दूरी पर अगर की सतह पर रखा जाता है। कपों को थर्मोस्टैट (37°) में रखा जाता है और अगले दिन, परीक्षण किए गए एंटीबायोटिक दवाओं के प्रति माइक्रोब की संवेदनशीलता की डिग्री डिस्क के चारों ओर विकास मंदता क्षेत्र के आकार से आंकी जाती है। विकास अवरोध के क्षेत्र की अनुपस्थिति इस एंटीबायोटिक के लिए सूक्ष्म जीव की असंवेदनशीलता को इंगित करती है।

जैविक विधि

नेत्र अभ्यास में, इसका उपयोग केवल उन मामलों में किया जाता है, जहां कठिन निदान के साथ, सूक्ष्म जीव के प्रकार को निर्धारित करने में विषाक्त गुण निर्णायक हो सकते हैं (उदाहरण के लिए, जब क्रमानुसार रोग का निदानडिप्थीरिया बेसिलस और ज़ेरोसिस बेसिलस)।

आंख के वायरल रोगों का प्रयोगशाला निदान

वर्तमान में, ट्रेकोमा वायरस (चित्र। 77) सहित वायरस का एक विशेष अध्ययन, ऊतक संस्कृतियों (चिकन भ्रूण, माउस जलोदर कार्सिनोमा, आदि) और इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी में संवर्धन करके किया जाता है।

चावल। 77. ट्रेकोमा में सेल समावेशन।

पर क्लिनिकल अभ्यासट्रेकोमा के निदान के लिए, Provachek-Halbershtedter के निकायों (समावेशन) की उपस्थिति या अनुपस्थिति के लिए कंजाक्तिवा के स्क्रैपिंग के साइटोलॉजिकल अध्ययन की विधि का उपयोग किया जाता है। ऐसा करने के लिए, एक कुंद स्केलपेल या एक कांच की स्लाइड के किनारे के साथ, कंजाक्तिवा (रक्त के बिना) के उपकला कवर को हटा दिया जाता है, जिसे कांच की स्लाइड पर एक पतली परत में लगाया जाता है, 5 मिनट के लिए हवा में सुखाया जाता है और तय किया जाता है। मिथाइल अल्कोहल या निकिफोरोव के मिश्रण के साथ एक गिलास में 15-20 मिनट के लिए कम करके ( एथिल ईथर और समान मात्रा में पूर्ण शराब)। रोमानोव्स्की-गिमेसा पेंट के ताजा तैयार समाधान (आसुत जल के 1 मिलीलीटर प्रति पेंट की एक बूंद की दर से) के साथ 3-4 घंटों के भीतर रंग दिया जाता है। फिर तैयारी को बहते पानी से धोया जाता है, हवा में सुखाया जाता है और एक माइक्रोस्कोप के तहत जांच की जाती है। इस मामले में, उपकला कोशिकाओं के नाभिक दागदार होते हैं गुलाबी रंग, प्रोटोप्लाज्म - हल्के नीले रंग में, समावेशन - नीले, नीले-बैंगनी रंग में (चित्र। 77)। उत्तरार्द्ध सूक्ष्म कणों के बीच स्थित कोकॉइड संरचनाओं के रूप में दिखाई देते हैं, और ट्रैकोमैटस वायरस के वाहक के रूप में पहचाने जाते हैं। वे अक्सर अनुपचारित ट्रेकोमा के ताजा मामलों में पाए जाते हैं, लेकिन पैराट्राकोमा नेत्रश्लेष्मलाशोथ के साथ भी हो सकते हैं।

शोध करना हाल के वर्षसंक्रामक के एक नए रूप की खोज की विषाणुजनित रोगआंख - महामारी keratoconjunctivitis, और इस बीमारी में नेत्रश्लेष्मला स्क्रैपिंग के एक साइटोलॉजिकल अध्ययन ने उपकला कोशिकाओं में अजीबोगरीब समावेशन का पता लगाना संभव बना दिया जो कि Prsvachek के शरीर (B. L. Polyak, N. V. Ploshinskaya) से पूरी तरह से अलग हैं।

सबसे विश्वसनीय अनुसंधान विधियों में से एक, जो अस्पतालों और क्लीनिकों की प्रयोगशालाओं में किया जाता है, बैक्टीरियोलॉजिकल है। यह एक जटिल, लेकिन बहुत महत्वपूर्ण विश्लेषण है, जिसके अनुसार वैज्ञानिक सटीक रूप से कह सकते हैं कि किस रोगज़नक़ ने बीमारी का कारण बना।

सबसे अधिक बार, गली में एक साधारण आदमी बकपोसेव जैसी चीज से मिलता है। वास्तव में, यह बैक्टीरियोलॉजिकल विधि के घटकों में से एक है।

अनुसंधान की बैक्टीरियोलॉजिकल विधि आगे के शोध के उद्देश्य से किसी व्यक्ति से जैविक सामग्री लेना है, और इसमें कुछ बैक्टीरिया की उपस्थिति के लिए सामग्री की जांच की जाएगी। ऐसा करने के लिए, टेस्ट ट्यूब की एकत्रित सामग्री को विशेष मीडिया में रखा जाएगा जिसमें बैक्टीरिया "विकसित" होंगे। और जहां विकास और प्रजनन होता है, उसके अनुसार संक्रमण का स्रोत निर्धारित किया जाएगा।

इस प्रकार का शोध क्षेत्र में आम है संक्रामक रोगकब चुनना है उचित उपचाररोगज़नक़ को ठीक से जानना आवश्यक है, क्योंकि कुछ बैक्टीरिया सबसे मजबूत एंटीबायोटिक दवाओं के लिए भी प्रतिरोधी हैं एक विस्तृत श्रृंखलाक्रियाएँ।

इसके अलावा, इस प्रकार के शोध का उपयोग सार्वजनिक खानपान प्रतिष्ठानों में कई स्वच्छता और महामारी विज्ञान निरीक्षणों द्वारा किया जाता है ताकि किसी विशेष बीमारी के प्रसार को रोका जा सके।

आज तक, बैक्टीरियोलॉजिकल विधि, या, जैसा कि कहना आसान है, बकपोसेव का उपयोग अक्सर किया जाता है, और एक विशेषज्ञ का मुख्य कार्य किसी व्यक्ति से सामग्री लेना है जब तक कि उसके लिए रोगाणुरोधी चिकित्सा शुरू नहीं हो जाती।

सूक्ष्म जीव विज्ञान उन सटीक विज्ञानों में से एक है जो गलतियों को बर्दाश्त नहीं करता है। इसलिए माइक्रोबायोलॉजिस्ट बनना इतना आसान नहीं है। दृढ़ता, सावधानी, साथ ही इच्छाशक्ति की आवश्यकता होती है, क्योंकि कम से कम कुछ परिणाम प्राप्त करने के लिए अक्सर एक ही सामग्री पर महीनों बैठना आवश्यक होता है।

माइक्रोबायोलॉजी में बैक्टीरियोलॉजिकल शोध पद्धति महत्वपूर्ण है क्योंकि यह आपको बैक्टीरिया का अध्ययन करने, उनके लिए अनुकूल वातावरण में उनका निरीक्षण करने और किसी विशेष दवा की प्रतिक्रिया का अध्ययन करने की अनुमति देती है।

इसके अलावा, बैक्टीरिया के अध्ययन के लिए धन्यवाद, अब यह निर्धारित करना संभव हो गया है कि कौन सा रोगज़नक़ एक विशेष बीमारी का कारण बनता है, और कई लोगों की जान बचाता है। यही कारण है कि सूक्ष्म जीव विज्ञान में इस पद्धति का इतना महत्वपूर्ण स्थान है।

विश्लेषण के लिए सामग्री का संग्रह

सबसे विश्वसनीय परिणाम प्राप्त करने के लिए, एक प्रयोगशाला कार्यकर्ता या देखभाल करनासभी स्वच्छता प्रक्रियाओं का पालन करना आवश्यक है, साथ ही उपकरण को अच्छी तरह से जीवाणुरहित करना भी आवश्यक है। इसके बाद ही सैंपल लिए जा सकेंगे।

सबसे अधिक बार, एक व्यक्ति से बैक्टीरियोलॉजिकल परीक्षा के लिए सामग्री ली जाती है:

1. कैल। आमतौर पर, इस तरह के विश्लेषण को निर्धारित किया जाता है यदि किसी व्यक्ति में आंतों के संक्रमण के सभी लक्षण होते हैं। यह आवश्यक है, क्योंकि शरीर में प्रवेश करने वाले लगभग सभी जीवाणुओं का विनाशकारी प्रभाव होता है, और प्रत्येक एंटीबायोटिक सभी प्रकार के रोगजनकों को सकारात्मक रूप से प्रभावित करने में सक्षम नहीं होता है।
2. नासॉफरीनक्स और ग्रसनी से बलगम। अक्सर, नासॉफिरिन्क्स और ग्रसनी से विश्लेषण लगातार गले में खराश के साथ-साथ लंबे समय तक चलने वाली नाक के मामले में लिया जाता है, क्योंकि ज्यादातर मामलों में, यदि ऐसा होता है, तो रोगज़नक़ डॉक्टरों की तुलना में बहुत अधिक गंभीर हो जाता है। परिणाम प्राप्त करने से पहले।
3. उनकी ब्रांकाई का कफ। यदि किसी व्यक्ति को निमोनिया है, तो उसे निश्चित रूप से इस विश्लेषण के लिए भेजा जाएगा।
4. मूत्र। जननांग प्रणाली के संदिग्ध संक्रमण के मामले में बैक्टीरियोलॉजिकल जांच के लिए रोगी का मूत्र।
5. रीड़ द्रव। कभी-कभी अंगों के पक्षाघात के साथ रोगियों को अस्पताल में भर्ती कराया जाता है, लेकिन साथ ही उन्हें अन्य बीमारियों के कोई लक्षण नहीं होते हैं, अर्थात, मस्तिष्क की गतिविधि के साथ सब कुछ क्रम में है, तंत्रिका अंत के माध्यम से भी चालन के साथ। यहां कारण संक्रमण के प्रवेश में निहित हो सकता है मेरुदण्ड. कवि है, कारण का जल्द से जल्द पता लगाने के लिए फसल लेना आवश्यक है।
6. सूजन के foci की सामग्री।
7. पुटी की सामग्री।

"वनस्पति पर बुवाई" विश्लेषण के बारे में अधिक जानकारी वीडियो में मिल सकती है।

इन सामग्रियों के लिए धन्यवाद मानव शरीरआप एक सटीक अध्ययन कर सकते हैं और समस्या की पहचान कर सकते हैं। सच है, सूक्ष्म जीव विज्ञान में कई प्रगति के बावजूद, बैक्टीरियोलॉजिकल सीडिंग इतनी जल्दी नहीं की जाती है।

परिणाम के लिए समय सीमा

इस तथ्य के बावजूद कि सभी विशेषज्ञ जल्द से जल्द परीक्षण करवाना चाहते हैं, और अक्सर बैठने और प्रतीक्षा करने का समय नहीं होता है, कुछ निश्चित समय सीमाएँ होती हैं जिसके बाद आप अध्ययन के परिणाम प्राप्त कर सकते हैं।

सूक्ष्म जीव विज्ञान में, स्पष्ट समय सीमाएँ होती हैं जो कुछ इस तरह दिखती हैं:

• यदि विश्लेषण के लिए मल लिया गया था, तो परिणाम पांच दिनों के भीतर प्राप्त किया जा सकता है। सबसे खराब स्थिति में, मामले में एक सप्ताह तक का समय लग सकता है। लेकिन पहले से ही पांचवें दिन, डॉक्टर लगभग रोगज़नक़ के बारे में बता सकते हैं।
• यदि विश्लेषण नासॉफरीनक्स से लिया गया था, तो औसतन छह दिनों के बाद, परिणाम तैयार होंगे।
• यदि एक विश्लेषण किया गया था, तो आपको दस दिन इंतजार करना होगा, क्योंकि विश्लेषण बहुत बड़ा है और इसे पूरा करने में बहुत अधिक समय लगता है।
• यदि आपको शरीर की वनस्पतियों का पता लगाने की आवश्यकता है, तो आपको चार से सात दिनों तक इंतजार करना होगा, यह इस बात पर निर्भर करता है कि बैक्टीरिया कैसे प्रकट होते हैं।
• यदि मूत्रजननांगी पथ का विश्लेषण किया जाता है, तो सटीक परिणाम एक सप्ताह, यानी 7 दिनों में तैयार हो जाएंगे।

इस घटना में कि अस्पताल में एक रोगी से परीक्षण लिया जाता है, तो उसका उपस्थित चिकित्सक पहले से ही चौथे या पांचवें दिन परिणामों का पता लगाने में सक्षम होगा, क्योंकि अक्सर प्रयोगशाला सीधे अस्पताल में स्थित होती है।

लेकिन अगर परीक्षण एक साधारण नगरपालिका क्लिनिक में लिए जाते हैं, तो आपको देरी के लिए तैयार रहने की आवश्यकता है। जितनी जल्दी हो सके परिणाम प्राप्त करने के लिए, और उन्हें यथासंभव विश्वसनीय बनाने के लिए, शहर में किसी एक प्रयोगशाला से सीधे संपर्क करना बेहतर है। उनमें से प्रत्येक भुगतान के आधार पर सेवाएं प्रदान करता है।

किसी भी अन्य अध्ययन की तरह, बैक्टीरियोलॉजिकल पद्धति में कई चरण शामिल हैं, जिनमें से प्रत्येक पिछले एक से कम महत्वपूर्ण नहीं है।

पहले चरण में शामिल हैं:

1. प्रशिक्षण। परीक्षण सामग्री को ठीक से लेना, प्रयोगशाला में लाना और यदि आवश्यक हो, तो इसे संसाधित करना आवश्यक है।
2. संवर्धन। यह प्रक्रिया तभी की जाती है जब परिणामी सामग्री में बैक्टीरिया की संख्या पर्याप्त न हो। ज्यादातर ऐसा खून के साथ होता है। इस मामले में, कुछ रक्त को एक गर्म स्थान पर ऐसे तापमान पर रखा जाता है जो बैक्टीरिया को गुणा करने के लिए प्रोत्साहित करता है।
3. माइक्रोस्कोपी। उपरोक्त सभी प्रक्रियाओं को पूरा करने के बाद, माइक्रोफ्लोरा, मात्रा और मुख्य गुणों को निर्धारित करने के लिए माइक्रोस्कोप के तहत सामग्री की जांच करना आवश्यक है।
4. कॉलोनियों का निर्माण। माइक्रोस्कोप के तहत विभिन्न माइक्रोफ्लोरा की पहचान करने के बाद, उनमें से प्रत्येक को अलग किया जाता है और एक विशेष कंटेनर में रखा जाता है।

दूसरे चरण में शामिल हैं:

1. उपनिवेशों के गुणों का अध्ययन। यह कार्यविधिइसमें बैक्टीरिया के व्यवहार का अध्ययन करना शामिल है कि वे कितनी तेजी से गुणा करते हैं, वे कैसे अनुकूल होते हैं, आदि। इस घटना में कि एक कॉलोनी में कई और बन गए हैं, तो प्रत्येक के गुणों का अध्ययन करना आवश्यक है।
2. शुद्ध संस्कृति। यहां, प्रत्येक कॉलोनियों को विशेष रूप से इसके लिए डिज़ाइन किए गए कंटेनर में रखा गया है और वे देखते हैं कि आगे क्या होता है।

तीसरे चरण में शामिल हैं:

1. विकास दर और संस्कृति शुद्धता का मापन। इस पर निर्भर करता है कि प्रजनन कितनी जल्दी हुआ, और यह भी कि क्या अन्य संस्कृतियाँ इससे प्रकट हुईं, बैक्टीरिया के परिवार को निर्धारित करना संभव है। तो, घोल के दाग के रंग से, वैज्ञानिक सटीक रूप से बता सकते हैं कि जीवाणु का शरीर पर विनाशकारी प्रभाव कैसे पड़ता है।
2. एंटीबायोटिक जांच। विशेषज्ञ द्वारा संस्कृति के प्रकार को सटीक रूप से निर्धारित करने में सक्षम होने के बाद, उसे कुछ एंटीबायोटिक दवाओं की प्रतिक्रिया के लिए इसकी जांच करनी चाहिए।

बैक्टीरियोलॉजिकल शोध पद्धति एक जटिल प्रक्रिया है जिसमें एकाग्रता और धैर्य की आवश्यकता होती है। इसलिए चिकित्सा शिक्षा प्राप्त करने वाले सभी लोग माइक्रोबायोलॉजिस्ट नहीं बनना चाहते हैं।

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बैक्टीरियोलॉजिकल विधि में रोगज़नक़ (एक ही प्रजाति के बैक्टीरिया युक्त आबादी) की शुद्ध संस्कृति को अलग करना शामिल है और इस रोगज़नक़ की पहचान करना बैक्टीरियोलॉजिकल अनुसंधान की मुख्य विधि है

एक विशेष व्यवस्थित समूह (प्रजाति, जीनस) से संबंधित स्थापित करने के लिए बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशाला में सूक्ष्मजीवों के गुणों के अध्ययन को उनकी पहचान कहा जाता है।

सामान्य तौर पर, अनुसंधान की बैक्टीरियोलॉजिकल विधि एक बहु-चरण बैक्टीरियोलॉजिकल अध्ययन है, जो 18-24 घंटे तक रहता है।

बैक्टीरियोलॉजिकल विधि - यह कैसे किया जाता है?

बैक्टीरियोलॉजिकल विधि में, अवायवीय संस्कृतियों को अवायवीय में रखा जाता है। गुब्बारे से हवा निकाल दी जाती है और उसे गैस के मिश्रण से बदल दिया जाता है जिसमें ऑक्सीजन नहीं होता है।

बैक्टीरियोलॉजिकल विधि का आधार रोगज़नक़ की शुद्ध संस्कृति का अलगाव है, जो अध्ययन के पहले चरण में होता है। रोगज़नक़ की एक शुद्ध संस्कृति को अलग करने के लिए, ली गई सामग्री को टीका लगाया जाता है। बुवाई, एक नियम के रूप में, घने पोषक माध्यम पर की जाती है, जिसे कथित रोगज़नक़ के गुणों के आधार पर चुना जाता है।

बैक्टीरियोलॉजिकल पद्धति में, यदि संभव हो तो, मीडिया का उपयोग किया जाता है, जिस पर केवल एक विशिष्ट प्रकार के बैक्टीरिया बढ़ते हैं - वैकल्पिक मीडिया, या मीडिया जो अन्य सूक्ष्मजीवों, या अन्यथा विभेदक नैदानिक ​​​​मीडिया से कथित रोगज़नक़ को अलग करना संभव बनाता है।

उदाहरण के लिए, बैक्टीरियोलॉजिकल निदान में आंतों में संक्रमण- एंडो माध्यम, टेल्यूराइट मीडिया का उपयोग डिप्थीरिया बेसिलस आदि को अलग करने के लिए किया जाता है। जब अवसरवादी सूक्ष्मजीवों को बैक्टीरियोलॉजिकल विधि से अलग किया जाता है, तो ली गई सामग्री की बुवाई सार्वभौमिक पोषक मीडिया पर की जाती है। ऐसे माध्यम का एक उदाहरण रक्त अगर है।

जीवाणु संस्कृतियों के अलगाव से जुड़े सभी जोड़तोड़ बर्नर की लौ पर किए जाते हैं।

बैक्टीरियोलॉजिकल विधि में, पोषक माध्यम पर सामग्री का टीका या तो एक गिलास या धातु के रंग के साथ या एक जीवाणु लूप के साथ इस तरह से किया जाता है कि परीक्षण सामग्री में मौजूद बैक्टीरिया पोषक माध्यम की सतह पर फैल जाते हैं। इस तरह के फैलाव के परिणामस्वरूप, प्रत्येक जीवाणु कोशिका पर्यावरण के अपने हिस्से में प्रवेश करती है।

एक रोगजनक सामग्री से एक रोगजनक की शुद्ध संस्कृति को अलग करते समय, जो कि विदेशी माइक्रोफ्लोरा से काफी दूषित होता है, शुद्ध संस्कृति को अलग करने की जैविक विधि का अक्सर उपयोग किया जाता है। यह निम्नानुसार किया जाता है: वे परीक्षण सामग्री के साथ रोगज़नक़ के प्रति संवेदनशील प्रयोगशाला जानवरों को संक्रमित करते हैं। एक जैविक विधि का एक अन्य उदाहरण है जब थूक में न्यूमोकोकी की सामग्री के लिए एक रोगी की जांच करते समय, सामग्री को सफेद चूहों में अंतःक्षिप्त किया जाता है। 4-6 घंटे के बाद उनके रक्त से न्यूमोकोकस की शुद्ध संस्कृति प्राप्त होती है।

इस घटना में कि अनुसंधान की बैक्टीरियोलॉजिकल पद्धति के परिणामस्वरूप, परीक्षण सामग्री में रोगज़नक़ की एक छोटी मात्रा की सामग्री की उम्मीद की जाती है, इसके संचय के लिए एक तरल पोषक माध्यम पर टीकाकरण किया जाता है, तथाकथित संवर्धन माध्यम, जो इस सूक्ष्मजीव के लिए इष्टतम है। इसके बाद, तरल पोषक माध्यम से पेट्री डिश में डाले गए ठोस माध्यम में फिर से बोया जाता है। रोगज़नक़ से संक्रमित माध्यम को थर्मोस्टैट में रखा जाता है, आमतौर पर एक निश्चित तापमान पर, जो बैक्टीरियोलॉजिकल विधि के लिए महत्वपूर्ण है।

बैक्टीरियोलॉजिकल रिसर्च विधि के दूसरे चरण में, एक घने पोषक माध्यम पर विकसित और एक जीवाणु कोशिका से उत्पन्न होने वाली जीवाणु कॉलोनियों का अध्ययन किया जाता है। (कॉलोनी और रोगज़नक़ों की एक शुद्ध संस्कृति है)। कालोनियों की सूक्ष्म और स्थूल परीक्षा परावर्तित और संचरित प्रकाश में की जाती है: नग्न आंखों के साथ, कम आवर्धन माइक्रोस्कोप के तहत, एक आवर्धक कांच के साथ।

उपनिवेशों के सांस्कृतिक गुणों पर ध्यान दिया जाता है: उनका आकार, आकार, रंग, किनारों की प्रकृति और सतह, संरचना, स्थिरता। इसके अलावा, लक्षित कॉलोनियों में से प्रत्येक का एक हिस्सा स्मीयर तैयार करने के लिए उपयोग किया जाता है। ग्राम स्मीयर दागदार होते हैं, सूक्ष्म रूप से, पृथक संस्कृति के टिंक्टोरियल (रंग से संबंध) और रूपात्मक गुणों का निर्धारण करते हैं और साथ ही इसकी शुद्धता की जांच करते हैं।

कॉलोनी के बाकी हिस्सों को इस प्रजाति के लिए इष्टतम माध्यम के साथ टेस्ट ट्यूब में टीका लगाया जाता है, उदाहरण के लिए, तिरछा अगर, एक अधिक संपूर्ण अध्ययन के लिए एक शुद्ध संस्कृति को जमा करने के लिए। थर्मोस्टेट में ट्यूबों को 18-24 घंटों के लिए स्थानांतरित किया जाता है। दूसरे चरण में, उपरोक्त अध्ययनों के अलावा, अक्सर विकसित कॉलोनियों की संख्या की गणना की जाती है।

अवसरवादी रोगजनकों के कारण होने वाली बीमारियों में इसका विशेष महत्व है। ऐसी बीमारियों में, किसी भी रोगज़नक़ की अग्रणी भूमिका का न्याय केवल रोग संबंधी सामग्री में पर्याप्त मात्रा में इसकी सामग्री से करने की अनुमति है। बड़ी संख्या मेंऔर अन्य वनस्पतियों पर इस रोगज़नक़ की प्रबलता।

इस तरह के एक अध्ययन का संचालन करने के लिए, ली गई परीक्षण सामग्री के क्रमिक कमजोर पड़ने को तैयार किया जाता है, जिसमें से एक पोषक माध्यम के साथ कपों पर बोया जाता है, उगाई गई कॉलोनियों की संख्या को कमजोर पड़ने से गुणा किया जाता है, जिसमें से सूक्ष्मजीवों की सामग्री होती है। सामग्री में निर्धारित है।

रोगज़नक़ की पृथक शुद्ध संस्कृति की पहचान और इस संस्कृति के लिए एंटीबायोटिक दवाओं और अन्य कीमोथेराप्यूटिक दवाओं के प्रति संवेदनशीलता का निर्धारण बैक्टीरियोलॉजिकल विधि का तीसरा चरण है। पृथक जीवाणु संस्कृति की पहचान टिंक्टोरियल, रूपात्मक, जैव रासायनिक, सांस्कृतिक, विषाक्त, एंटीजेनिक गुणों द्वारा की जाती है।

पहला कदम तिरछी अगर पर उगाई गई संस्कृति से एक धब्बा लेना है, बैक्टीरिया की आकृति विज्ञान की जांच करना और विकसित बैक्टीरिया की संस्कृति की शुद्धता की जांच करना है। इसके बाद, बैक्टीरिया की पृथक शुद्ध संस्कृति को हिस मीडिया पर टीका लगाया जाता है। जैव रासायनिक गुणों को निर्धारित करने के लिए अन्य मीडिया पर टीका लगाना वांछनीय है।

एंजाइमेटिक, या जैव रासायनिक, बैक्टीरिया के गुण एंजाइमों के कारण होते हैं जो प्रोटीन, कार्बोहाइड्रेट के टूटने में शामिल होते हैं, जिससे विभिन्न सब्सट्रेट की कमी और ऑक्सीकरण होता है।

इसके अलावा, प्रत्येक प्रकार के बैक्टीरिया इसके लिए एंजाइमों का एक निरंतर सेट पैदा करते हैं। सबसे अधिक बार, एंटीजेनिक गुणों का अध्ययन करते समय, कांच पर एक एग्लूटिनेशन प्रतिक्रिया का उपयोग किया जाता है।

रोगाणुओं के विष गठन का निर्धारण विवो या इन विट्रो में एंटीटॉक्सिन के साथ टॉक्सिन न्यूट्रलाइजेशन रिएक्शन का उपयोग करके किया जाता है। कुछ मामलों में, अन्य विषाणु कारकों का भी अध्ययन किया जाता है। उपरोक्त अध्ययन, जो एक बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशाला में किए जाते हैं, हमें जीनस या रोगज़नक़ के प्रकार को निर्धारित करने की अनुमति देते हैं।

संक्रमण के स्रोत का पता लगाने सहित, रोग की महामारी श्रृंखला की पहचान करने के लिए, बैक्टीरिया की अंतर-विशिष्ट पहचान की जाती है। बैक्टीरिया की अंतःविशिष्ट पहचान का सार फागोवर या फागोटाइप का निर्धारण करना है, पृथक एंटीजेनिक बैक्टीरिया के विभिन्न गुणों का अध्ययन। फेज प्रकार निर्धारित करने की प्रक्रिया को फेज टाइपिंग कहा जाता है। फेज टाइपिंग किसके साथ की जाती है टाइफाइड ज्वर, स्टेफिलोकोकल संक्रमण, पैराटाइफाइड बी।

एक पोषक माध्यम के साथ एक कप पर, जिसे एक स्पैटुला पृथक शुद्ध संस्कृति के साथ बीज दिया जाता है, विभिन्न नैदानिक ​​​​चरणों को बूंद-बूंद करके लागू करें। यदि संस्कृति इस चरण के प्रति संवेदनशील है, तो बैक्टीरियोलॉजिकल परीक्षा के परिणामस्वरूप, तथाकथित नकारात्मक कॉलोनियां (सजीले टुकड़े) देखी जाती हैं, जो नष्ट बैक्टीरिया के गोलाकार क्षेत्रों के गठन की तरह दिखती हैं। रोगज़नक़ संस्कृति कई या एक चरण के प्रति संवेदनशील हो सकती है।

बैक्टीरिया के दवा-प्रतिरोधी रूपों के व्यापक प्रसार के कारण, तर्कसंगत कीमोथेरेपी की नियुक्ति के लिए, रोगज़नक़ की एक पृथक शुद्ध संस्कृति के कीमोथेराप्यूटिक दवाओं के लिए एंटीबायोग्राम - प्रतिरोध या संवेदनशीलता का निर्धारण करना आवश्यक है। एंटीबायोग्राम के लिए या तो पेपर डिस्क विधि या सबसे सटीक लेकिन बोझिल सीरियल कमजोर पड़ने की विधि का उपयोग किया जाता है।

पेपर डिस्क विधि एंटीबायोटिक दवाओं के साथ गर्भवती डिस्क के आसपास बैक्टीरिया के विकास के निषेध के क्षेत्र की पहचान पर आधारित है। धारावाहिक तनुकरण की विधि का उपयोग करने के मामले में, एक रासायनिक तैयारी - एक तरल पोषक माध्यम के साथ एक एंटीबायोटिक को टेस्ट ट्यूब में पतला किया जाता है, जिसके बाद टेस्ट ट्यूब में समान संख्या में बैक्टीरिया को टीका लगाया जाता है। जीवाणु वृद्धि की अनुपस्थिति या उपस्थिति से, परिणाम दर्ज किए जाते हैं। उपभेदों की पहचान निर्धारित करने के लिए बैक्टीरियोलॉजिकल शोध पद्धति के परिणामस्वरूप, परिणामी एंटीबायोग्राम भी महामारी विज्ञान के उद्देश्यों की पूर्ति कर सकता है।

बैक्टीरियोकैरियर का पता लगाने पर बार-बार अध्ययन किया जा सकता है, क्योंकि सामग्री के एक हिस्से में रोगज़नक़ का पता लगाना संभव नहीं है।

वर्तमान में, आधुनिक दुनिया में, बैक्टीरिया के प्रकार और जीनस को निर्धारित करने के लिए त्वरित तरीके हैं। तो, रूस में, संकेतक कागजात की एक प्रणाली का उपयोग किया जाता है - एसआईबी, जो 6-12 घंटों के बाद और बड़ी संख्या में पोषक मीडिया का उपयोग किए बिना शुद्ध जीवाणु संस्कृति को अलग करना संभव बनाता है। संक्रामक रोगों के तेजी से निदान के लिए इम्यूनोफ्लोरेसेंट विधि का भी व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है (सीरोलॉजिकल अध्ययन देखें)।

बैक्टीरियोलॉजिकल रिसर्च मेथड (बीएलएमआई)- पोषक मीडिया पर खेती द्वारा बैक्टीरिया की शुद्ध संस्कृतियों के अलगाव और सूक्ष्मजीवों की रूपात्मक, सांस्कृतिक, जैव रासायनिक, आनुवंशिक, सीरोलॉजिकल, जैविक, पारिस्थितिक विशेषताओं के अध्ययन के आधार पर प्रजातियों के लिए उनकी पहचान पर आधारित एक विधि।

स्वास्थ्य मंत्रालय द्वारा अनुमोदित मानक नैदानिक ​​​​योजनाओं का उपयोग करके संक्रमण का बैक्टीरियोलॉजिकल निदान किया जाता है।

शुद्ध संस्कृति -एक ही प्रजाति के जीवाणु, पोषक माध्यम पर उगाए जाते हैं, जिनके गुणों का अध्ययन किया जा रहा है।

तनाव- एक विशिष्ट समय पर एक विशिष्ट स्रोत से पृथक एक ही प्रजाति के सूक्ष्मजीवों की पहचान की गई शुद्ध संस्कृति। एक ही प्रजाति के उपभेद जैव रासायनिक, आनुवंशिक, सीरोलॉजिकल, जैविक और अन्य गुणों के साथ-साथ अलगाव के स्थान और समय में बहुत भिन्न हो सकते हैं।

बीएलएमआई के लक्ष्य:

1. एटियलॉजिकल निदान: सूक्ष्मजीवों की शुद्ध संस्कृति का अलगाव और इसकी पहचान।

2. अतिरिक्त गुणों का निर्धारण, उदाहरण के लिए, एंटीबायोटिक दवाओं और बैक्टीरियोफेज के लिए सूक्ष्मजीव की संवेदनशीलता।

3. सूक्ष्मजीवों की संख्या का निर्धारण (यूपीएम के कारण होने वाले संक्रमणों के निदान में महत्वपूर्ण)।

4. सूक्ष्मजीवों की टाइपिंग, यानी अध्ययन के आधार पर अंतर-विशिष्ट अंतरों का निर्धारण जेनेटिकतथा महामारी विज्ञान(फागोवर और सेरोवर) मार्करइसका उपयोग महामारी विज्ञान के उद्देश्यों के लिए किया जाता है, क्योंकि यह आपको विभिन्न अस्पतालों, भौगोलिक क्षेत्रों में विभिन्न रोगियों और बाहरी वातावरण की विभिन्न वस्तुओं से पृथक सूक्ष्मजीवों की समानता स्थापित करने की अनुमति देता है।

BLMI में कई चरण शामिल हैं,ऐरोबेस, ऐच्छिक अवायवीय तथा बाध्यकारी अवायवीय जीवों के लिए भिन्न।

I. एरोबिक्स और वैकल्पिक अवायवीय जीवों की शुद्ध संस्कृति के अलगाव में BLMI के चरण।

मंच।

ए सामग्री का संग्रह, परिवहन, भंडारण, पूर्व उपचार।कभी-कभी, बुवाई से पहले, पृथक सूक्ष्मजीव के गुणों को ध्यान में रखते हुए, सामग्री का चयनात्मक प्रसंस्करण किया जाता है। उदाहरण के लिए, एसिड प्रतिरोधी माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस की उपस्थिति के लिए थूक या अन्य सामग्री की जांच करने से पहले, सामग्री को एसिड या क्षार समाधान के साथ इलाज किया जाता है।

बी. संवर्धन माध्यम में सीडिंग(यदि आवश्यक हो) यह किया जाता है यदि परीक्षण सामग्री में बैक्टीरिया की एक छोटी मात्रा होती है, उदाहरण के लिए, रक्त संस्कृति को अलग करते समय। ऐसा करने के लिए, बड़ी मात्रा में बुखार की ऊंचाई पर लिया गया रक्त (वयस्कों में 8-10 मिलीलीटर, बच्चों में 4-5 मिलीलीटर) को 1:10 के अनुपात में माध्यम में टीका लगाया जाता है (रक्त जीवाणुनाशक की क्रिया को दूर करने के लिए) कारक); बुवाई 18-24 घंटों के लिए 37 0 C के तापमान पर की जाती है।

बी परीक्षण सामग्री की माइक्रोस्कोपी।परीक्षण सामग्री से एक स्मीयर तैयार किया जाता है, जिसे ग्राम या अन्य विधि से दाग दिया जाता है और सूक्ष्मदर्शी किया जाता है। वर्तमान माइक्रोफ्लोरा, इसकी मात्रा का आकलन करें। आगे के शोध के दौरान प्राथमिक स्मीयर में मौजूद सूक्ष्मजीवों को अलग किया जाना चाहिए।

छ. पृथक कालोनियों को प्राप्त करने के लिए पोषक माध्यमों पर बुवाई।पृथक कॉलोनियों को प्राप्त करने के लिए सामग्री को एक अंतर निदान या चयनात्मक माध्यम के साथ एक प्लेट पर यांत्रिक पृथक्करण द्वारा लूप या स्पैटुला के साथ टीका लगाया जाता है। बुवाई के बाद, पकवान को उल्टा कर दिया जाता है (संक्षेपण तरल की बूंदों के साथ कालोनियों को धब्बा से बचने के लिए), हस्ताक्षरित और थर्मोस्टेट में 37 0 सी के तापमान पर 18-24 घंटों के लिए रखा जाता है।

यह याद रखना चाहिए कि सूक्ष्मजैविक संस्कृतियों की बुवाई और पुनर्रोपण करते समय, कार्यकर्ता का ध्यान पोषक माध्यमों के संदूषण को रोकने और दूसरों के संक्रमण और आत्म-संक्रमण को रोकने के लिए सड़न रोकनेवाला नियमों के अनुपालन की ओर आकर्षित किया जाना चाहिए!

अवसरवादी सूक्ष्मजीवों के कारण संक्रमण के मामले में, जहां रोग संबंधी सामग्री में मौजूद सूक्ष्मजीवों की संख्या मायने रखती है, सामग्री का एक मात्रात्मक टीकाकरण किया जाता है, जिसके लिए सामग्री के 100 गुना कमजोर पड़ने (आमतौर पर 3 कमजोर पड़ने) की एक श्रृंखला तैयार की जाती है। टेस्ट ट्यूब में एक बाँझ आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान में। उसके बाद, पेट्री डिश में पोषक तत्व मीडिया पर प्रत्येक कमजोर पड़ने के 50 μl बोया जाता है।

मंच।

A. मीडिया पर कॉलोनी के आकारिकी का अध्ययन, उनकी माइक्रोस्कोपी।वे व्यंजनों को देखते हैं और इष्टतम पोषक माध्यम, विकास दर और सूक्ष्मजीवों के विकास की प्रकृति को नोट करते हैं। अध्ययन के लिए चुनें केंद्र के करीब, स्ट्रोक के साथ स्थित पृथक कॉलोनियां।यदि कई प्रकार की कॉलोनियां बढ़ती हैं, तो प्रत्येक की अलग से जांच की जाती है। कालोनियों के संकेतों का आकलन करें (तालिका। 7)। यदि आवश्यक हो, फसलों के साथ व्यंजन एक आवर्धक कांच के माध्यम से या कम आवर्धन लेंस और एक संकुचित एपर्चर के साथ एक माइक्रोस्कोप का उपयोग करके देखा जाता है। वे कालोनियों के विभिन्न रूपों के टिंकटोरियल गुणों का अध्ययन करते हैं, इसके लिए अध्ययन के तहत कॉलोनी का एक हिस्सा तैयार किया जाता है। धब्बा,ग्राम या अन्य विधियों से सना हुआ, सूक्ष्म रूप से और संस्कृति की शुद्धता की आकृति विज्ञान का निर्धारण। यदि आवश्यक हो, डाल कांच पर सांकेतिक आरएपॉलीवलेंट सीरम के साथ।

बी शुद्ध संस्कृति का संचय।एक शुद्ध संस्कृति को संचित करने के लिए, सभी आकारिकी की अलग-अलग कॉलोनियों को तिरछी अगर या किसी अन्य पोषक माध्यम के साथ अलग-अलग टेस्ट ट्यूब में उपसंस्कृत किया जाता है और थर्मोस्टेट में +37 0 C पर ऊष्मायन किया जाता है (यह तापमान अधिकांश सूक्ष्मजीवों के लिए इष्टतम है, लेकिन यह अलग हो सकता है, उदाहरण के लिए, के लिए कैम्पिलोबैक्टीरियम एसपीपी।- +42 0 सी, कैंडिडा एसपीपी। और यर्सिनिया पेस्टिस- +25 0 सी)।

क्लिगलर का माध्यम आमतौर पर एंटरोबैक्टीरिया के संचय माध्यम के रूप में उपयोग किया जाता है।

क्लिगलर माध्यम की संरचना:एमपीए, 0.1% ग्लूकोज, 1% लैक्टोज, हाइड्रोजन सल्फाइड अभिकर्मक (आयरन सल्फेट + सोडियम थायोसल्फेट + सोडियम सल्फाइट), फिनोल रेड इंडिकेटर। माध्यम का प्रारंभिक रंग रास्पबेरी-लाल है, माध्यम टेस्ट ट्यूबों में "तिरछा" है: इसमें एक स्तंभ (2/3) और एक बेवल सतह (1/3) है।

Kligler के माध्यम में बुवाई सतह पर एक स्ट्रोक और एक स्तंभ में एक इंजेक्शन द्वारा की जाती है।

मंच।

ए. संचय माध्यम पर विकास के लिए लेखांकन, संस्कृति की शुद्धता का आकलनएक ग्राम स्मीयर में। विकास पैटर्नपृथक शुद्ध संस्कृति। दृष्टि से स्वच्छ संस्कृति एक समान वृद्धि की विशेषता है। पर सूक्ष्मदर्शी द्वारा परीक्षणइस तरह की संस्कृति से तैयार एक सना हुआ धब्बा, रूपात्मक और टिंकटोरियल रूप से सजातीय कोशिकाओं को देखने के विभिन्न क्षेत्रों में पाया जाता है। हालांकि, कुछ प्रकार के जीवाणुओं में निहित स्पष्ट फुफ्फुसीयता के मामले में, शुद्ध संस्कृति से स्मीयर में विभिन्न आकारिकी वाली कोशिकाएं एक साथ हो सकती हैं।

यदि Kligler संकेतक माध्यम का उपयोग संचय माध्यम के रूप में किया गया था, तो कॉलम और बेवल वाले भाग में इसके रंग में परिवर्तन का मूल्यांकन किया जाता है, जिसके अनुसार जैव रासायनिक गुण निर्धारित किए जाते हैं: ग्लूकोज का किण्वन, लैक्टोज और हाइड्रोजन सल्फाइड का उत्पादन। जब लैक्टोज विघटित होता है, तो माध्यम का ढलान वाला हिस्सा पीला हो जाता है; जब ग्लूकोज विघटित होता है, तो स्तंभ पीला हो जाता है। शर्करा के अपघटन के दौरान CO2 के निर्माण के साथ, गैस के बुलबुले या स्तंभ में एक विराम बनता है। हाइड्रोजन सल्फाइड उत्पादन के मामले में, फेरस सल्फेट को फेरस सल्फाइड में बदलने के कारण इंजेक्शन के साथ कालापन देखा जाता है।

Kligler माध्यम (चित्र 23) के रंग में परिवर्तन की प्रकृति को सूक्ष्मजीवों द्वारा नाइट्रोजनयुक्त पदार्थों के टूटने की असमान तीव्रता और एरोबिक (ढलान सतह पर) और अवायवीय (एक में) के तहत क्षारीय उत्पादों के गठन द्वारा समझाया गया है। कॉलम) शर्तें।

एरोबिक स्थितियों के तहत, एक मध्यम स्तंभ की तुलना में ढलान वाली सतह पर अधिक तीव्र क्षार निर्माण होता है। इसलिए, माध्यम में मौजूद ग्लूकोज के कम मात्रा में अपघटन के दौरान, बेवल वाली सतह पर बनने वाला एसिड जल्दी से बेअसर हो जाता है। वहीं, लैक्टोज के अपघटन के दौरान, जो उच्च सांद्रता में एक माध्यम में मौजूद होता है, क्षारीय उत्पाद एसिड को बेअसर करने में सक्षम नहीं होते हैं।

स्तंभ में अवायवीय स्थितियों के तहत, क्षारीय उत्पाद नगण्य मात्रा में बनते हैं, इसलिए यहां ग्लूकोज किण्वन का पता लगाया जाता है।

चावल। 23.क्लिगलर संकेतक माध्यम:

1 - प्रारंभिक,

2 - वृद्धि के साथ ई कोलाई

3- वृद्धि के साथ एस. पैराटाइफी बी,

4 - वृद्धि के साथ एस टाइफीस

ई कोलाईगैस बनाने के साथ ग्लूकोज और लैक्टोज को विघटित करें, हाइड्रोजन सल्फाइड का उत्पादन न करें। वे मीडिया ब्रेक के साथ कॉलम और बेवल वाले हिस्से के पीलेपन का कारण बनते हैं।

एस. पैराटाइफीगैस के निर्माण के साथ ग्लूकोज को विघटित करें, लैक्टोज-नकारात्मक। वे टूटने के साथ स्तंभ के पीलेपन का कारण बनते हैं, बेवल वाला हिस्सा रंग नहीं बदलता है और रास्पबेरी रहता है। जिसमें एस. पैराटाइफी बीहाइड्रोजन सल्फाइड का उत्पादन (इंजेक्शन के दौरान एक काला रंग दिखाई देता है), एस. पैराटाइफी एहाइड्रोजन सल्फाइड का उत्पादन नहीं होता है।

एस टाइफीसगैस बनने के बिना ग्लूकोज को विघटित करें, लैक्टोज-नकारात्मक, हाइड्रोजन सल्फाइड का उत्पादन करें। वे स्तंभ को बिना टूटे पीले होने का कारण बनते हैं, बेवल वाला हिस्सा रंग नहीं बदलता है और रास्पबेरी रहता है, इंजेक्शन के दौरान काला रंग दिखाई देता है।

शिगेला एसपीपी।ग्लूकोज-पॉजिटिव, लैक्टोज-नेगेटिव, हाइड्रोजन सल्फाइड का उत्पादन नहीं करते हैं। वे स्तंभ के पीलेपन का कारण बनते हैं (सेरोवर के आधार पर ब्रेक के साथ या बिना), बेवल वाला हिस्सा रंग नहीं बदलता है और लाल रंग का रहता है।

बी शुद्ध संस्कृति की अंतिम पहचान(प्रजातियों या प्रकार के स्तर तक पृथक सूक्ष्मजीव की व्यवस्थित स्थिति का निर्धारण) और एंटीबायोटिक दवाओं के लिए पृथक संस्कृति के संवेदनशीलता स्पेक्ट्रम का निर्धारण।

इस स्तर पर एक शुद्ध संस्कृति की पहचान करने के लिए, जैव रासायनिक, आनुवंशिक, सीरोलॉजिकल और जैविक संकेत(तालिका 8)।

नियमित प्रयोगशाला अभ्यास में, पहचान के दौरान सभी गुणों का अध्ययन करने की आवश्यकता नहीं होती है। सूचनात्मक, सुलभ, सरल परीक्षणों का उपयोग किया जाता है, जो पृथक सूक्ष्मजीव की प्रजातियों (संस्करण) संबद्धता को निर्धारित करने के लिए पर्याप्त है।

4. जीवाणुओं का वर्गीकरण। आधुनिक टैक्सोनॉमी और नामकरण के सिद्धांत, बुनियादी टैक्सोनोमिक इकाइयाँ। एक प्रजाति, प्रकार, संस्कृति, जनसंख्या, तनाव की अवधारणा।

5. माइक्रोस्कोपी के तरीके। संक्रामक रोगों के निदान के लिए सूक्ष्म विधि।

6. रोगाणुओं और उनकी व्यक्तिगत संरचनाओं को धुंधला करने के तरीके।

7. बैक्टीरिया की आकृति विज्ञान और रासायनिक संरचना। प्रोटोप्लास्ट। एल - बैक्टीरिया के रूप।

8. बैक्टीरिया की अल्ट्रास्ट्रक्चर।

9. जीवाणुओं में स्पोरुलेशन। रोगजनक बीजाणु बनाने वाले रोगाणु।

10. बैक्टीरिया में कैप्सूल। उनका पता लगाने के तरीके।

11. फ्लैगेला और बैक्टीरिया में समावेशन। उनका पता लगाने के तरीके।

14. जीवाणुओं की वृद्धि और प्रजनन। जीवाणु जनसंख्या प्रजनन के कैनेटीक्स।

15. रिकेट्सिया की आकृति विज्ञान और अल्ट्रास्ट्रक्चर। क्लैमाइडिया की आकृति विज्ञान और अल्ट्रास्ट्रक्चर। रोगजनक प्रजातियां।

16. स्पाइरोकेट्स की आकृति विज्ञान और अल्ट्रास्ट्रक्चर। वर्गीकरण, रोगजनक प्रजातियां। चयन के तरीके।

17. माइकोप्लाज्मा की आकृति विज्ञान और अल्ट्रास्ट्रक्चर। मनुष्यों के लिए रोगजनक प्रजातियां।

18. वाइरस का सिस्टेमैटिक्स और नामकरण। वायरस के आधुनिक वर्गीकरण के सिद्धांत।

19. वायरस का विकास और उत्पत्ति। वायरस और बैक्टीरिया के बीच मुख्य अंतर।

20. वायरस की आकृति विज्ञान, अवसंरचना और रासायनिक संरचना। वायरस के मुख्य रासायनिक घटकों के कार्य।

21. विषाणुओं का प्रजनन। वायरस प्रजनन के मुख्य चरण। परीक्षण सामग्री में वायरस के संकेत के लिए तरीके।

22. वायरोलॉजिकल डायग्नोस्टिक विधि। वायरस की खेती के तरीके।

23. सेल संस्कृतियों। सेल संस्कृतियों का वर्गीकरण। सेल संस्कृतियों के लिए पोषक मीडिया। सेल कल्चर में वायरस के संकेत के तरीके।

24. चरणों की आकृति विज्ञान, अवसंरचना और रासायनिक संरचना। फेज प्रजनन के चरण। विषाणुजनित और समशीतोष्ण चरणों के बीच अंतर.

25. प्रकृति में चरणों का वितरण। फेज का पता लगाने और प्राप्त करने के तरीके। चरणों का व्यावहारिक उपयोग।

26. संक्रामक रोगों के निदान के लिए बैक्टीरियोलॉजिकल विधि।

27. पोषक माध्यम, उनका वर्गीकरण। पोषक तत्वों की आवश्यकताएं।

28. जीवाणुओं के एंजाइम, उनका वर्गीकरण। जीवाणु एंजाइमों के अध्ययन के लिए पोषक माध्यमों को डिजाइन करने के सिद्धांत।

29. जीवाणु खेती के मूल सिद्धांत। बैक्टीरिया की वृद्धि और प्रजनन को प्रभावित करने वाले कारक। बैक्टीरिया के सांस्कृतिक गुण।

30. एरोबिक और एनारोबिक बैक्टीरिया की शुद्ध संस्कृतियों को अलग करने के सिद्धांत और तरीके।

31. मिट्टी, पानी, हवा का माइक्रोफ्लोरा। रोगजनक प्रजातियां जो पर्यावरण में बनी रहती हैं और मिट्टी, पानी, भोजन, वायु के माध्यम से संचरित होती हैं।

32. स्वच्छता - सांकेतिक सूक्ष्मजीव। अगर - अनुमापांक, अगर - सूचकांक, निर्धारण के तरीके।

34. संघों में सूक्ष्मजीवों के बीच संबंध। सूक्ष्मजीव - प्रतिपक्षी, एंटीबायोटिक दवाओं और अन्य औषधीय तैयारी के उत्पादन में उनका उपयोग।

35. भौतिक, रासायनिक और जैविक कारकों के रोगाणुओं पर प्रभाव।

36. बंध्याकरण और कीटाणुशोधन। पोषक मीडिया और प्रयोगशाला कांच के बने पदार्थ के लिए बंध्याकरण के तरीके।

38. सूक्ष्मजीवों की वंशानुगत परिवर्तनशीलता के रूप और तंत्र। उत्परिवर्तन, मरम्मत, उनके तंत्र।

43. वायरस के आनुवंशिकी। आनुवंशिक सामग्री का अंतर-विशिष्ट और अंतर-विशिष्ट आदान-प्रदान।

44. संक्रामक रोगों के उपचार और रोकथाम में प्रयुक्त रोगाणुरोधी कीमोथेरेपी दवाओं के मुख्य समूह।

45. एंटीबायोटिक्स। वर्गीकरण। रोगाणुओं पर जीवाणुरोधी दवाओं की क्रिया के तंत्र।

26. संक्रामक रोगों के निदान के लिए बैक्टीरियोलॉजिकल विधि।

बैक्टीरियोलॉजिकल विधि में रोगज़नक़ (एक ही प्रजाति के बैक्टीरिया युक्त आबादी) की शुद्ध संस्कृति को अलग करना शामिल है और इस रोगज़नक़ की पहचान करना बैक्टीरियोलॉजिकल अनुसंधान की मुख्य विधि है

एक विशेष व्यवस्थित समूह (प्रजाति, जीनस) से संबंधित स्थापित करने के लिए बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशाला में सूक्ष्मजीवों के गुणों के अध्ययन को उनकी पहचान कहा जाता है।

सामान्य तौर पर, बैक्टीरियोलॉजिकल शोध पद्धति एक बहु-चरण बैक्टीरियोलॉजिकल परीक्षा है, जो 18-24 घंटे तक चलती है।

बैक्टीरियोलॉजिकल विधि में, अवायवीय संस्कृतियों को अवायवीय में रखा जाता है। गुब्बारे से हवा निकाल दी जाती है और उसे गैस के मिश्रण से बदल दिया जाता है जिसमें ऑक्सीजन नहीं होता है।

बैक्टीरियोलॉजिकल विधि का आधार रोगज़नक़ की शुद्ध संस्कृति का अलगाव है, जो अध्ययन के पहले चरण में होता है। रोगज़नक़ की एक शुद्ध संस्कृति को अलग करने के लिए, ली गई सामग्री को टीका लगाया जाता है। बुवाई, एक नियम के रूप में, घने पोषक माध्यम पर की जाती है, जिसे कथित रोगज़नक़ के गुणों के आधार पर चुना जाता है।

बैक्टीरियोलॉजिकल पद्धति में, यदि संभव हो तो, मीडिया का उपयोग किया जाता है, जिस पर केवल एक विशिष्ट प्रकार के बैक्टीरिया बढ़ते हैं - वैकल्पिक मीडिया, या मीडिया जो अन्य सूक्ष्मजीवों, या अन्यथा विभेदक नैदानिक ​​​​मीडिया से कथित रोगज़नक़ को अलग करना संभव बनाता है।

बैक्टीरियोलॉजिकल विधि में, पोषक माध्यम पर सामग्री का टीका या तो एक गिलास या धातु के रंग के साथ या एक जीवाणु लूप के साथ इस तरह से किया जाता है कि परीक्षण सामग्री में मौजूद बैक्टीरिया पोषक माध्यम की सतह पर फैल जाते हैं। इस तरह के फैलाव के परिणामस्वरूप, प्रत्येक जीवाणु कोशिका पर्यावरण के अपने हिस्से में प्रवेश करती है।

इस घटना में कि अनुसंधान की बैक्टीरियोलॉजिकल पद्धति के परिणामस्वरूप, परीक्षण सामग्री में रोगज़नक़ की एक छोटी मात्रा की सामग्री की उम्मीद की जाती है, इसके संचय के लिए एक तरल पोषक माध्यम पर टीकाकरण किया जाता है, तथाकथित संवर्धन माध्यम, जो इस सूक्ष्मजीव के लिए इष्टतम है। इसके बाद, तरल पोषक माध्यम से पेट्री डिश में डाले गए ठोस माध्यम में फिर से बोया जाता है। रोगज़नक़ से संक्रमित माध्यम को थर्मोस्टैट में रखा जाता है, आमतौर पर एक निश्चित तापमान पर, जो बैक्टीरियोलॉजिकल विधि के लिए महत्वपूर्ण है।

बैक्टीरियोलॉजिकल रिसर्च विधि के दूसरे चरण में, एक घने पोषक माध्यम पर विकसित और एक जीवाणु कोशिका से उत्पन्न होने वाली जीवाणु कॉलोनियों का अध्ययन किया जाता है। (कॉलोनी और रोगज़नक़ों की एक शुद्ध संस्कृति है)। कालोनियों की सूक्ष्म और स्थूल परीक्षा परावर्तित और संचरित प्रकाश में की जाती है: नग्न आंखों के साथ, कम आवर्धन माइक्रोस्कोप के तहत, एक आवर्धक कांच के साथ।

उपनिवेशों के सांस्कृतिक गुणों पर ध्यान दिया जाता है: उनका आकार, आकार, रंग, किनारों की प्रकृति और सतह, संरचना, स्थिरता। इसके अलावा, लक्षित कॉलोनियों में से प्रत्येक का एक हिस्सा स्मीयर तैयार करने के लिए उपयोग किया जाता है। ग्राम स्मीयर दागदार होते हैं, सूक्ष्म रूप से, पृथक संस्कृति के टिंक्टोरियल (रंग से संबंध) और रूपात्मक गुणों का निर्धारण करते हैं और साथ ही इसकी शुद्धता की जांच करते हैं।

कॉलोनी के बाकी हिस्सों को इस प्रजाति के लिए इष्टतम माध्यम के साथ टेस्ट ट्यूब में टीका लगाया जाता है, उदाहरण के लिए, तिरछा अगर, एक अधिक संपूर्ण अध्ययन के लिए एक शुद्ध संस्कृति को जमा करने के लिए। थर्मोस्टेट में ट्यूबों को 18-24 घंटों के लिए स्थानांतरित किया जाता है। दूसरे चरण में, उपरोक्त अध्ययनों के अलावा, अक्सर विकसित कॉलोनियों की संख्या की गणना की जाती है।

इस तरह के एक अध्ययन का संचालन करने के लिए, ली गई परीक्षण सामग्री के क्रमिक कमजोर पड़ने को तैयार किया जाता है, जिसमें से एक पोषक माध्यम के साथ कपों पर बोया जाता है, उगाई गई कॉलोनियों की संख्या को कमजोर पड़ने से गुणा किया जाता है, जिसमें से सूक्ष्मजीवों की सामग्री होती है। सामग्री में निर्धारित है।

रोगज़नक़ की पृथक शुद्ध संस्कृति की पहचान और इस संस्कृति के लिए एंटीबायोटिक दवाओं और अन्य कीमोथेराप्यूटिक दवाओं के प्रति संवेदनशीलता का निर्धारण बैक्टीरियोलॉजिकल विधि का तीसरा चरण है। पृथक जीवाणु संस्कृति की पहचान टिंक्टोरियल, रूपात्मक, जैव रासायनिक, सांस्कृतिक, विषाक्त, एंटीजेनिक गुणों द्वारा की जाती है।

पहला कदम तिरछी अगर पर उगाई गई संस्कृति से एक धब्बा लेना है, बैक्टीरिया की आकृति विज्ञान की जांच करना और विकसित बैक्टीरिया की संस्कृति की शुद्धता की जांच करना है। इसके बाद, बैक्टीरिया की पृथक शुद्ध संस्कृति को हिस मीडिया पर टीका लगाया जाता है। जैव रासायनिक गुणों को निर्धारित करने के लिए अन्य मीडिया पर टीका लगाना वांछनीय है।

रोगाणुओं के विष गठन का निर्धारण विवो या इन विट्रो में एंटीटॉक्सिन के साथ टॉक्सिन न्यूट्रलाइजेशन रिएक्शन का उपयोग करके किया जाता है। कुछ मामलों में, अन्य विषाणु कारकों का भी अध्ययन किया जाता है। उपरोक्त अध्ययन, जो एक बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशाला में किए जाते हैं, हमें जीनस या रोगज़नक़ के प्रकार को निर्धारित करने की अनुमति देते हैं।

पेपर डिस्क विधि एंटीबायोटिक दवाओं के साथ गर्भवती डिस्क के आसपास बैक्टीरिया के विकास के निषेध के क्षेत्र की पहचान पर आधारित है। धारावाहिक तनुकरण की विधि का उपयोग करने के मामले में, एक रासायनिक तैयारी - एक तरल पोषक माध्यम के साथ एक एंटीबायोटिक को टेस्ट ट्यूब में पतला किया जाता है, जिसके बाद समान संख्या में बैक्टीरिया को टेस्ट ट्यूब में टीका लगाया जाता है। जीवाणु वृद्धि की अनुपस्थिति या उपस्थिति से, परिणाम दर्ज किए जाते हैं। उपभेदों की पहचान निर्धारित करने के लिए बैक्टीरियोलॉजिकल शोध पद्धति के परिणामस्वरूप, परिणामी एंटीबायोग्राम भी महामारी विज्ञान के उद्देश्यों की पूर्ति कर सकता है।

बैक्टीरियोकैरियर का पता लगाने पर बार-बार अध्ययन किया जा सकता है, क्योंकि सामग्री के एक हिस्से में रोगज़नक़ का पता लगाना संभव नहीं है।